Abstract Low transformation efficiency is one of the main limiting factors in the establishment of genetic transformation of wheat via Agrobacterium tumefaciens. To determine more favorable conditions for T-DNA delivery and explant regeneration after infection, this study investigated combinations of acetosyringone concentration and pH variation in the inoculation and co-cultivation media and co-culture temperatures using immature embryos from two Brazilian genotypes (BR 18 Terena and PF 020037). Based on transient expression of uidA, the most favorable conditions for T-DNA delivery were culture media with pH 5.0 and 5.4 combined with co-culture temperatures of 22 °C and 25 °C, and a 400 μM acetosyringone supplement. These conditions resulted in blue foci in 81% of the embryos. Media with more acidic pH also presented reduced A. tumefaciens overgrowth during co-culture, and improved regeneration frequency of the inoculated explants. BR 18 Terena was more susceptible to infection by A. tumefaciens than PF 020037. We found that it is possible to improve T-DNA delivery and explant regeneration by adjusting factors involved in the early stages of A. tumefaciens infection. This can contribute to establishing a stable transformation procedure in the future.

A alcachofra é uma hortaliça consumida tanto in natura quanto industrializada. Seu alto valor nutricional e medicinal desperta interesse pelo seu cultivo no Brasil. A micropropagação é uma técnica que permite a produção de populações homogêneas e a rápida multiplicação de progênies selecionadas. Este trabalho objetivou estabelecer um protocolo de micropropagação para progênies de alcachofra, utilizando explantes obtidos de plântulas germinadas in vitro. Nós cotiledonares de três progênies (P1, P2 e P3) foram avaliados quanto à taxa de multiplicação, altura e número de folhas, ao longo de quatro subcultivos sucessivos, em dois meios de cultura (M1 e M2). Na fase de enraizamento in vitro foram avaliados o enraizamento de mudas (%), o comprimento da maior raiz (cm) e o volume de raiz (cm3). E, na fase de aclimatização foi avaliada a taxa de sobrevivência das brotações com e sem raízes, aos 30 dias do transplante, em três diferentes substratos. O meio de cultura M1 (1,0 mg/L de BAP e 0,1 mg/L de ANA) promoveu maior desenvolvimento de brotos axilares e taxa média de multiplicação 5,1 para as progênies P1 e P2. A progênie P1 apresentou maior frequência de enraizamento in vitro das brotações (51,9%) em comparação com a progênie P2 (14,9%). Os substratos S1 (Mecplant Horta 2(r): 100%) e S2 (Mecplant Horta 2(r): 50% e casca de arroz carbonizada: 50%) foram os mais adequados para a aclimatização das mudas micropropagadas das progênies P1 e P2, respectivamente, sendo alcançada a frequência de sobrevivência de 75%. Foi possível estabelecer o processo de micropropagação de duas progênies de alcachofra, selecionadas para o consumo in natura, utilizando como fonte de explante nó cotiledonar obtido a partir de plântulas germinadas in vitro.

Globe artichoke is a vegetable that can be consumed both fresh and industrialized, and its high nutritional and medicinal value arouses interest in its cultivation in Brazil. Micropropagation enables rapid multiplication of selected progenies. This study aimed to establish a micropropagation protocol for artichoke progenies using explants obtained from in vitro germinated seedlings. Cotyledon nodes of three progenies (P1, P2 and P3) were evaluated for multiplication rate, length and number of leaves over four successive subcultures on two media cultures (M1 and M2). In rooting phase percentage of rooted shoots, length of the longest root (cm) and root volume (cm3) were evaluated. In the acclimatization phase survival rate of shoots with and without roots was evaluated after 30 days of transplant in three different substrates. The culture medium M1 (1.0 mg/L BA and 0.1 mg/L NAA) promoted the best development of the axillary shoots and the multiplication rate of 5.1 for the progenies P1 and P2. The P1 progeny showed higher frequency of in vitro shoot rooting (51.9%) compared to the progeny P2 (14.9%). The substrates S1 (Mecplant Horta 2(r): 100%) and S2 (Mecplant Horta(r) 2: 50% and burned rice husk: 50%) were the most suitable for acclimatization of the micropropagated shoots of progenies P1 and P2, respectively, reaching a survival frequency of 75%. It was possible to establish the micropropagation for two progenies of artichoke selected for fresh consumption using as source of explant the cotyledon node obtained from in vitro germinated seedlings.

Foi avaliado o comportamento de segmentos nodais lenhosos e herbáceos de plantas adultas e, os efeitos da caseína hidrolisada (CH 500 mg L-1), da cinetina (KIN; 6-furfurilaminopurina 0,46 µM e 4,65 µM) e do carvão ativado (CA 1,5 g L-1) na indução e na posterior multiplicação de brotos, visando estabelecer um sistema de propagação in vitro a partir de plantas adultas de Ginkgo biloba. Segmentos nodais lenhosos não emitiram brotos axilares e apresentaram 100% de contaminação fúngica e bacteriana durante o cultivo. Segmentos nodais de ramos herbáceos foram desinfestados com sucesso e apresentaram alta capacidade regenerativa in vitro. A CH foi essencial para a indução de brotos axilares e também para a posterior multiplicação destes, estimulando a formação de brotos em 85% dos segmentos nodais e múltiplos brotos em 35% destes na fase de estabelecimento das culturas. Na fase de multiplicação, 66,6% dos propágulos multiplicaram formando novos brotos e, 33,3% formaram múltiplos brotos quando cultivados com CH. A KIN e o CA provocaram efeitos inibitórios no processo organogênico de ginkgo. Foram observados dois padrões distintos de desenvolvimento de brotos in vitro, à semelhança do que ocorre in vivo: 1) brotos curtos, com segmentos internodais muito próximos, expansão de algumas folhas e de crescimento lento e; 2) brotos longos, com nós separados por segmentos internodais distintos e com maior crescimento apical que os anteriores. Este é o primeiro relato da formação in vitro de múltiplos brotos em segmentos nodais de plantas adultas de Ginkgo biloba.

The in vitro performance of herbaceous and woody nodal segments from adult plants and the effect of hydrolyzed casein (HC 500 mg L-1), kinetin (KIN; 6-furfurylaminopurine 0.46 and 4.65 µM) and activated charcoal (AC 1.5 g L-1) were evaluated upon new shoots induction and development, and to establish a system of in vitro propagation from adult plants of Ginkgo biloba. Woody nodal segments did not produce axillary shoots and presented 100% of bacterial and fungal contamination in culture. However, nodal segments from herbaceous shoots were successfully disinfected and displayed high in vitro morphogenic capacity. The HC was essential for the axillary shoots induction and further multiplication, stimulating shoot formation in 85% of the cultured nodal segments and multiple shoots induction in 35% of them at establishment stage. During the multiplication stage, 66.6% of propagules formed new shoots and 33.3% of them formed multiple shoots when cultured with HC. The KIN and AC inhibited the organogenic process in ginkgo. Two distinct patterns of sprouts development were observed in vitro, similar to what occurs in vivo: 1) short shoots with crowded internodes and expansion of only a few leaves and slow growth; 2) long shoots with separated nodes and marked apical growth. This is the first report of multiple shoots in vitro formation in nodal segments obtained from adult plants of Ginkgo biloba.

Objetivou-se neste trabalho propor uma metodologia para classificação comercial dos capítulos de gérbera com base no coeficiente de sobreposição das flores trans. Foram utilizados três a oito capítulos de vinte e oito cultivares de gérbera com aptidão para corte e sete acessos não comerciais. Em cada um dos capítulos realizou-se a medição da largura do conjunto das flores trans (flores do raio interno) e a soma da largura do conjunto das flores trans e do raio (flores do raio externo). Com isso, calcularam-se os coeficientes de sobreposição das flores trans (CS= largura do conjunto das flores trans / Σ da largura do conjunto das flores trans e do raio) e submeteram-se os dados à análise multivariada, com a finalidade de verificar o agrupamento mediante matriz de distância euclidiana média. Propõe-se que gérberas com CS= 0,01 a 0,15 sejam classificadas como simples, CS= 0,16 a 0,40, semidobradas e CS superior a 0,41, dobradas. O coeficiente de sobreposição pode ser utilizado para sistematizar a classificação dos capítulos de gérbera, reduzindo as divergências e a subjetividade nas decisões de produtores, floricultores e melhoristas.

The aim of this work was to propose a methodology for commercial classification of gerbera´s capitulum based on the trans flowers overlap coefficient. Three to eight capitula of twenty-eight cultivars of gerbera cut flower and seven non-commercial accesses were used. The width measurement of the trans flowers group (internal ray flower) as well as the sum of the width of the trans and ray flowers (external ray flower) groups were taken from each capitulum. The average of each access and the overlap coefficient were calculated (CS = width of the trans flowers group / Σ of the width of the trans and ray flowers groups) and submitted to the multivariate analysis, to verify the grouping by the average Euclidian distance matrix. It is proposed that gerberas with CS= 0.01 to 0.15 be classified as simple, CS= 0.16 to 0.40 as semi-double and CS superior to 0.41 as double. The overlap coefficient (CS) can be used to systematize the classification of the gerbera capitula, reducing the divergences in the classification and the subjectivity in the decisions of producers, florists and breeders.

A baixa taxa de multiplicação e alta de contaminação dos explantes são algumas das dificuldades na micropropagação da alcachofra. A germinação de sementes in vitro pode ser uma alternativa de obtenção de explantes sadios para estabelecimento de futuros cultivos in vitro. O trabalho desenvolvido no Laboratório de Biotecnologia Vegetal da UPF-FAMV teve por objetivo avaliar a germinação in vitro de sementes de alcachofra cv. Nobre, em três experimentos, testando concentrações de cloro ativo na assepsia das sementes; tratamentos do tegumento (mantido intacto, com cortes laterais ou eliminação); condições de luminosidade (claro ou escuro); e dois meios de cultura [meio MS, com concentração de sais reduzida à metade (M1) e meio MS completo(M2)]. Em ambos foram adicionados 30 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar, sendo o pH ajustado para 5,6 ± 0,1 com NaOH. Os cultivos foram realizados em câmara de crescimento. A obtenção de plântulas sadias de alcachofra em curto espaço de tempo (sete dias), para utilização como fonte de explantes é viável a partir da germinação in vitro de sementes sem o tegumento (77,5% de germinação), utilizando os meios de cultura M1 ou M2 e câmara de crescimento desprovida de luz. Nestas condições, a assepsia das sementes pode ser realizada com álcool 70% por 30 min e posterior imersão em solução contendo 2% de cloro ativo por dez minutos, antes da remoção do tegumento.

Low multiplication rates and high contamination in the explants are some of the difficulties in artichoke micropropagation. In vitro seed germination may be an alternative to obtain healthy explants for use in future in vitro cultivation. This project developed at the laboratory of Universidade de Passo Fundo was established to evaluate cv. 'Nobre' artichoke seeds in vitro germination. In three experiments, active chloride concentrations on seed aseptic technique; tegument treatment (kept intact, with side cuts and elimination); lighting conditions (light or dark); and two cultivation media [MS medium, with salts concentration reduced by half (M1) and MS medium, full strenger (M2)] have been tested. In both cases, 30 g L-1 sucrose and 7 g L-1 agar were added, with pH adjusted to 5.6 with NaOH. Cultivation took place in a growth chamber. It is viable to obtain healthy artichoke plantlets in short time (seven days), to be used as a source of explants from in vitro seed germination without the tegument (77,5% of germination), using the M1 or M2 culture medium and growth chamber without light. In these conditions, the asepsis of seeds can be done with alcohol 70% during 30 minutes and the subsequent immersion in solution of 2% of active chlorine during 10 minutes, before the removal of the tegument.

Este trabalho foi conduzido com o objetivo de confirmar o número de cromossomos em cultivares de Gerbera hybrida Hort., determinar o número de cromossomos em acessos não comerciais de Gerbera sp., avaliar a viabilidade de pólen e a possibilidade de cruzamentos entre cultivares e acessos não comerciais. Foram coletados ápices de raízes e pólen de seis cultivares e de sete acessos não comerciais. O material coletado foi corado com carmim acético a 45%. A contagem dos cromossomos foi realizada em células metafásicas intactas e a estimativa de viabilidade de pólen realizada por meio da contagem do número de grãos de pólen viáveis e não viáveis. A possibilidade de cruzamento entre as cultivares e entre as cultivares e acessos não comerciais foi avaliada por meio da hibridação entre os genitores femininos, cv. Terra Fame e acesso A8, e masculinos, cvs. Cariba e Azteca. Todos os acessos contiveram cinqüenta cromossomos, indicando que a variação morfológica nos capítulos (simples, semidobrado e dobrado) não é devida a mutações cromossômicas numéricas ou a poliploidia. A viabilidade do pólen variou de 87,67% a 99,27%. A formação de sementes foi de 4,46% nos cruzamentos entre cultivares, e de 50% entre o A8 e as cultivares. A compatibilidade genômica entre os acessos, a alta viabilidade do pólen e o sucesso na obtenção de sementes entre acessos comercias e não comerciais, revela a possibilidade de produção de híbridos com novas combinações alélicas e transferência de caracteres desejáveis dos acessos não comerciais para os comerciais

This work was conducted to confirm the chromosomes number of Gerbera hybrida Hort. cultivars, to determine the chromosomes number in the non commercial accessions of Gerbera sp., and to estimate the pollen viability and the possibility of crossings among different accessions. Root-tip and pollen were collected from six cultivars and seven non commercial accessions. The collected material was stained with acetic carmim at 45%. The chromosome counting was performed in metafasic intact cells and the pollen viability estimated by counting the number of viable and non viable pollen grains. The crossing possibility among cultivars and among cultivars and non commercial accessions was evaluated through the hybridization between the feminine cv. Terra Fame and A8 and masculine genitors, cvs. Cariba and Azteca. All accessions presented fifty chromosomes, indicating that the morphological variation in the capitulum (simple, semidouble and double) is not due to the chromosome number mutation or polyploidy. The evaluated accessions displayed high pollen viability, varying from 87.67% to 99.27. The seed formation was 4.46% in the crossings among cultivars, and 50% among cultivar and non commercial accession of gerbera. The genomic compatibility among the accessions, the high pollen viability and the success in the seed formation among commercial and non-commercial accessions, reveal the possibility of hybrid production with new allelic combination and transference of desirable traits from the non-commercial to the commercial accessions.